Pourquoi utilise-t-on deux amorces en PCR ?

Demandé par: Zulima Manteuffel | Dernière mise à jour: Thu, 12 Jan 2023
Catégorie: science génétique
4.9/5 (93 Views . 15 Votes)
Deux amorces sont utilisées dans chaque réaction PCR et elles sont conçues de manière à flanquer la région cible (région qui doit être copiée). C'est-à-dire qu'on leur donne des séquences qui les feront se lier aux brins opposés de l'ADN matrice, juste aux bords de la région à copier.

À cet égard, pourquoi utilise-t-on des amorces en PCR ?

sont les brins d'ADN (ou d'ARN) qui servent de base initiale au processus de réplication de l'ADN, et ils doivent délimiter le segment de la matrice d'ADN à amplifier. Dans le processus, deux sont appariés au segment d'ADN.

À côté de ci-dessus, que se passe-t-il si une seule amorce est utilisée en PCR ? L'anti-sens continuerait d'être un site de liaison actif pour la Taq Polymerase dans une réaction. Il s'avère que l'utilisation peut effectivement donner un produit qui peut être dans des réactions de séquençage ultérieures telles que le séquençage de terminaison de chaîne.

À cet égard, pourquoi des amorces directes et inverses sont-elles utilisées en PCR ?

Deux sont utilisés, un pour chacun des simples brins complémentaires d'ADN libérés lors de la dénaturation. Le s'attache au codon de départ de l'ADN matrice (le brin anti-sens), tandis que le s'attache au codon d'arrêt du brin complémentaire d'ADN (le brin sens).

Quelle amorce est la plus appropriée pour la PCR ?

Les amorces pour la PCR et le séquençage doivent avoir une valeur comprise entre 40 et 60 %, le 3' d'une amorce se terminant par C ou G pour favoriser la liaison. L'extrémité 3' de l'amorce doit correspondre exactement à la matrice, car l'extension par polymérase, pendant la PCR, dépend d'une bonne correspondance à l'extrémité 3'.